抗菌肽知识问答（三）
发布时间[2016-02-29] 浏览次数:2913
1. 现在有很多同类的产品， 养殖户该怎么选择合适的抗菌肽产品呢？
（1） 虽然绝大多数抗菌肽具有广谱抗菌的性质，但是不同的细菌对某一特定抗菌肽的敏感性不尽相同。所以在抗菌肽实际应用上，单一类型的抗菌肽，其作用效果也会依敏感菌的差异而有所不同。尤其针对于应用到畜牧业的抗菌肽来说，最重要的是其抗菌谱应该与禽畜多发病的病原菌相吻合，且其 MIC 值（最低抑菌浓度）较小，才能具有良好的应用效果。
（2） 产品的稳定性。抗菌肽如果作为饲料添加剂产品，必须具备以下特征： 1. 能耐受低 pH 环境（即胃酸的影响） 2. 高温对其无影响（生产过程中） 3. 其结构对消化道酶类不敏感。所以我们需要应用一些特殊的基因工程手段，对采用的抗菌肽进行筛选和优化设计，从而构建出具备上述稳定特性的工程菌，以保证抗菌肽的优良品质。
（3） 我们现在不断强调食品安全和饲料安全，抗菌肽应用于活体动物的安全性如何，也是重要的考虑因素。
（4）有条件的养殖企业还可以通过抗菌肽活性检测（抗菌肽检测标准）、抗体水平检测、猪群健康指数（日增重变化、发病率变化、料肉比变化等） 等检测方法评价和选择产品。
2. 猪特异性免疫与非特异性免疫是什么样？
生猪免疫系统相关概念一般认为，猪 3 周龄前无主动免疫，通过乳源性 IgG/IgA 获得被动免疫保护。猪体可通过许多机制来对抗病原感染，这些机制可分为六类：
（1） 补体系统 - 这是一种非特异性保护机制，任何异体细胞或病毒如果表面不带有猪本身特有的特定蛋白质，都会受到补体系统的作用。这套机制涉及血浆中的若干种化学物质，这些化学物质共同作用消灭病原微生物。
（2） 化学因素 - 粘液、唾液、胃肠液中含有各种非特异性的酶（如唾液中的溶菌酶）和酸，这些酶和酸可杀死病原，或使病原失活。
（3） 机械因素 - 包括皮肤、粘液、汗液、鼻腔内膜、口腔、食管、肠道、盲肠、阴道、尿流、排粪等等。
（4） 巨噬细胞 - 全身各处的组织以及血液里都能找到这种细胞。血液里的巨噬细胞称为单核细胞。这些细胞将细菌吞入体内并消化。除细菌外，它们对控制病毒和真菌疾病也有重要作用。巨噬细胞有两种，白细胞和单核细胞。
（5） 特异性免疫 - 特异性免疫有两种。一种是通过细胞来完成的免疫，称为细胞免疫。一种是通过血液中的抗体实现的免疫，称为体液免疫。 T 型淋巴细胞接触到抗原时会激发细胞免疫，产生抗体。细胞免疫产生的过程需要 7-14 天。体液免疫则是由 B 型淋巴细胞激发，这些细胞以前见过这种病原，可迅速产生免疫反应。有些淋巴细胞会杀死带有抗原的其它细胞， 或针对抗原做出迅速反应。（6） 免疫球蛋白 - 特异性抗体，包括免疫球蛋白 G（ IgG）、免疫球蛋白 M（ IgM）和免疫球蛋白 A（ IgA）等。这些免疫球蛋白存在于血液、乳汁当中，尤其是初乳当中。机体所有的内壁也含有免疫球蛋白。有些病原会抑制动物的免疫系统，使动物更易感染其它疾病。例如猪肺炎支原体、伪狂犬病毒、巴氏杆菌、猪流感病毒以及蓝耳病毒等，这些病原都会导致肺炎。
术语
血浆样本 - 卫生条件下用注射器采得全血样品，再加上抗凝剂使血样保持液态。将这种血样放在离心机中旋转，红细胞和白细胞就会沉在底部结成板，剩下的清澈液体即为血浆。
血清学 - 关于血清的研究。在试验室里对血清样本进行试验，以便检测其所含特定抗体的水平。
血清样本 - 卫生条件下用注射器采集全血，令其自然凝固。凝固血块上面有秸秆色的液体，就是血清，可用细管吸取。其中含有抗体。
滴度 - 血清样本中所含特定抗体的浓度。用血清学试验结果转为阴性之前血清所能稀释的最大倍数表示。
毒力 - 微生物的致病性。致病能力强的微生物称为强毒力微生物。
3. 抗菌肽能否与疫苗联合使用？
答：疫苗产生抗体的原理为：
养殖中因为圆环病毒、应激、抗生素滥用、重金属超标等原因会导致吞噬细胞数量减少、活性降低，无法完成抗原的识别、处理、呈递过程。格拉姆抗菌肽能提高巨噬细胞的活性，可促进单核细胞转化为巨噬细胞。对于疫苗接种，可增强免疫应答反应，提高抗体产生水平，提高群体抗体均匀度。理论上，接种疫苗的同时使用抗菌肽会减轻疫苗的危险性。
4. 抗菌肽能否与抗生素联用？
（1）传统的抗生素能抑制细菌细胞壁的合成（如阿莫西林）或破换 G-的外膜（如氯已定）。这样，抗菌肽可更顺利穿过细胞壁，进而作用于细胞膜。
（2）格拉姆抗菌肽可以作用于细胞膜， 增大膜的通透性。这样， 抗生素更容易进入菌体，从而作用于菌内的靶点（如甲硝唑）。因此，抗生素与抗菌肽具有协同作用的优点。
格拉姆抗菌肽的独特作用机理，能快速解除耐药菌的阻拦，联合抗生素进行治疗有极大的协同作用。 解决“有病治不好”的问题。非特异性免疫力是养殖的根本，解除耐药是治疗的核心！格拉姆抗菌肽一键解决免疫力低下、细菌耐药。
5. 抗菌肽首先应作为药物开发，先期大量投入铺垫做很多药理毒理研究，作为应用开发的必须前提是什么？
答：从饲用抗菌肽来讲，无论是作为药物还是添加剂都必须做大量的基础性研究工作，包括全面的药理和毒理试验，证明有足够的安全性和有效性才能继续下面的工作。但具体运作方式有所不同，一般企业都会选择先做饲料添加剂，再向兽药方向发展。一个比较明显的例子就是那西肽，也是先获得饲料添加剂批号，隔较长时间才获得兽药准入许可的。
注： 那西肽(Nosihcptide)为含硫多肽类抗生素 ，由 Streptomyces actuosus 发酵产生。其结构为 l2 种氨基酸及衍生物合成的多肽。分子量为 1222。 1998 年那西肽被批准为国家三类新兽药， 2001 年那西肽被列为可在鸡饲料中使用的药物添加剂。 2002 年杭州汇能生物技术有限公司首次对那西肽进行产业化研究， 2003 年那西肽开始投放市场，商品名为“诺农”。
26. 目前饲料用途的抗菌肽究竟具有多大可行性?谁是强大的反对者?
答：关于抗菌肽的研究进行了十几年，其结构检测和功效评价方法已经建立起来，并且相当成熟。而涉及到饲料层面的技术和评价方法(比如安全性和有效性)也已经应用多年，有成熟的标准体系。 我们前期进行的 1.8 万头保育猪养殖实验也充分证明了格拉姆抗菌肽的效果， 所以饲料中应用抗菌肽是可行的。在抗菌肽发展与应用过程中，还没有听到明确的反对声音。但也可能出现一些对此认识不清楚的人、团体或者是利益攸关者比如传统抗生素生产企业反对使用抗菌肽。从某种意义上来讲，抗菌肽的出现将会逐渐取代传统抗生素，这对抗生素企业的利益会产生影响，因此抗生素生产经营企业有可能成为主要反对者。
7. 国内哪些机构、哪些专家有抗菌肽技术优势?
答：国内抗菌肽的研发机构众多，其中中科院亚热带所印遇龙院士、 中科院动物所何宏轩研究员、中国科学院昆明动物研究所赖仞研究员、国家饲料工程技术研究中心谯仕彦教授、复旦大学李英霞教授、 中科院深圳先进院刘陈立研究员、 中国农业大学孙振钧教授、吉林大学农学部韩文瑜教授、浙江大学汪以真教授、军事医学科学院军事兽医研究所李吉平副研究员华南农业大学黄自然教授、 暨南大学黄亚东教授、 温刘发副教授在各自的抗菌肽研究领域颇有建树。
8. 抗菌肽最大优点和最大缺点是什么(性质/功能上，生产/商业上)?
答：现在看来抗菌肽最大的优点应该体现在性质和功能上，就是比较新颖，属于新一代动物保健产品，能有效解决现有抗生素使用过程中存在的诸多弊端。而属于新一代产品也是其最大的缺点，主要体现在商业推广上。因为与传统的动物保健产品不同，人们还没有充分的认识抗菌肽，对其作用持有怀疑态度，所以推广上存在一些难度。不过随着人们认识的深入，以及抗菌肽研究的深入，这些疑惑可能会慢慢散去，抗菌肽成为动物保健的主流产品可能只是时间问题。
9. 关于猪的免疫抑制
免疫抑制是动物免疫功能异常的一种表现，是指动物机体在一或多种致病因素的共同作用下，免疫系统受到损害，导致机体暂时性的或持久性的免疫应答功能絮乱，以及对疾病的高度易感。
免疫抑制的危害：
1. 造成特异性免疫失败，就如所有猪场都按程序免疫了猪瘟苗，而许多猪场摆脱不了猪瘟的困扰；
2. 造成非特异性免疫力下降，疾病多发。猪群抵抗力低下，处于随时爆发多种疾病的亚健康状态；
3. 一旦发病治疗难，治愈率不高，死亡率高。造成猪免疫抑制性因素
1. 疾病：猪瘟、猪流感、蓝耳病、细小病毒、伪狂犬、圆环病毒、巨细胞病毒病、传染性胸膜炎放线杆菌、喘气病、弓形体等
2. 毒素：毒素不仅能引起干细胞变性坏死，而且可溶解淋巴细胞，双重抑制体液免疫应答与细胞免疫应答，造成免疫抑制
内毒：机体代谢过程中产生的有害物质（酮酸、尿酸、乳酸、自由基）、多余的脂肪及老旧坏死的细胞。
外毒：外界环境带来的有害物质, 霉菌毒素、氨气、硫化氢等有害气体，细菌真菌等侵入病原微生物的代谢产物、长期使用化药及疫苗使用不当、频繁消毒等；
3. 营养因素： Va、 Vb、 Vc、 Vd 等和硒、铁微量元素等是猪免疫器官发育、受体表达、细胞活化、抗体合成、补体激活的必须的营养物质，饲料营养不均衡会导致免疫抑制；
4. 应激因素：养猪产生实践证明，猪舍温度过热、过冷、猪群拥挤、转群混群、分娩、断奶、换料、接种、噪音、长途运输等因素，都会影响淋巴细胞活性，引起免疫抑制；
5.其他因素：重金属：汞、铅
